Фундаментальные молекулярно-биологические и биотехнологические исследования позволяют выявлять молекулярные мишени, воздействие на которые может вызывать противоопухолевый эффект. На этой основе целенаправленно создаются вещества, каждое из которых атакует определенную мишень, т.н. таргетные препараты. Избирательное поступление препарата непосредственно в опухоль и направленное воздействие на неё позволяет значительно снизить побочное действие на нормальные клетки и максимально увеличить терапевтический эффект лекарственного средства.

Направленность действия того или иного агента осуществляется за счет использования лиганд-опосредованного механизма. Лиганды способствуют селективному связыванию препарата с опухоль-ассоциированными антигенами или рецепторами и доставке лекарственных веществ непосредственно к месту их назначения. В качестве векторных молекул, в частности, могут выступать моноклональные антитела.

В арсенале РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН имеются моноклональные антитела к различным опухолеассоциированным антигенам, позволяющие создавать препараты направленного действия против широкого спектра онкологических заболеваний: низкодифференцированных неходжкинских лимфом и В-клеточных лейкозов (анти - CD20 препараты), Т-клеточных лимфом и ХЛЛ (анти-CD5 препараты), рака молочной железы (анти-Her2/neu препараты), рака яичника (анти- Muc-1 препараты), рака предстательной железы (анти- PSA препараты) (табл. 1).

Таблица 1.
Моноклональные антитела для направленной доставки препаратов

 

Представленная панель антител, используется, в частности, в качестве направляющего вектора в конструкции иммунолипосомальных форм противоопухолевых препаратов. В РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН разработаны анти-ICO-80 иммунолипосомальные конструкции противоопухолевого препарата доксорубицин и оригинального отечественного препарата из группы нитрозомочевины – лизомустин, а также анти-CD20 иммунолипосомальный тиосенс для фотодинамической терапии опухолей.

К моноклональным антителам, используемым в конструировании адресных препаратов, предъявляют определенные требования. МКА должны сохранять свою специфичность при конъюгации с транспортируемым агентом, иметь достаточную афинность, обладать низкой иммуногенностью. С этой целью используют гуманизированные МКА, для удаления мышиного белка, а также Fab'фрагменты антител для удаления фрагментов Fc. Антитела должны эффективно интернализовываться клетками-мишенями путем эндоцитоза, обладать биологической активностью и усиливать противоопухолевый ответ. МКА должны быть технологичны в производстве и иметь достаточный срок хранения.

Для исключения индукции иммунного ответа на введение моноклональных антител применяются гуманизированные моноклональные антитела. В РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН создана новая оригинальная отечественная технология производства рекомбинантных терапевтических антител (наноплантиподи) основанная на их продукции в транзиторно трансфецированных растениях (рис.1).

Рис. 1. Схематическое строение наноплантиподи.

 

В будущем из растительного материала планируется выделение фармакологически чистой субстанции антител для приготовления терапевтических препаратов. Трансфекция растительного материала производится специально сконструированными вирусоподобными генетическими векторами с высокой трансфекционной активностью. Применение специальных генетических вспомогательных элементов, обеспечивающих высокий уровень экспрессии, позволяет получать до 1 г целевого продукта с одного килограмма зеленой массы.

Растения как «фабрики» для продукции чужеродных белков (в том числе, «терапевтических» белков, антител) имеют ряд преимуществ по сравнению с клетками бактерий, дрожжей и млекопитающих. Клетки растений биологически безопасны, т. к. не содержат патогенных для человека вирусов и прионов. Наработка целевых белков в растениях не требует применения дорогостоящей аппаратуры (ферментеры), культуральных сред и системы стерильности; стоимость выращивания исходных опытных растений несравнимо ниже стоимости культивирования клеток бактерий, дрожжей или животных. Например, стоимость белков, выделяемых из растений, в 10-30 раз ниже стоимости аналогичных продуктов, полученных при культивировании трансформированных бактерий.

В настоящее время в РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН разработаны гуманизированные моноклональные анти-Her2/neu антитела (аналог Герцептина – фитомаб - 85). Активность полученного рекомбинантного моноклонального антитела полностью совпадает с импортным аналогом.

 

                                    А                                                                                B

 

 

Рис.2. Иммуноцитохимия клеток, экспрессирующих Her2/neu

А – импортное МКА;
B – фитомаб -85.

На стадии разработки находятся гуманизированные моноклональные антитела к Muc-1 и CD-20 антигенам.